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化妝品中激素類成份檢驗(yàn)的研究與進(jìn)展
Research and Development of HormoneDetection in Cosmetics
王欣然
中國(guó)食品藥品檢定研究院
WANG Xin-ran
National Institutes for Food and Drug Control
董亞蕾
中國(guó)食品藥品檢定研究院
DONG Ya-lei
National Institutes for Food and Drug Control
王海燕
中國(guó)食品藥品檢定研究院
WANG Hai-yan
National Institutes for Food and Drug Control
路勇＊
中國(guó)食品藥品檢定研究院
LU Yong*
National Institutes for Food and Drug Control
摘要 Abstract
本文綜述了化妝品樣品前處理技術(shù)以及液相色譜法、高效液相色譜法、超高效液相色譜法、液相色譜- 質(zhì)譜法聯(lián)用、液相色譜- 高分辨質(zhì)譜、毛細(xì)管電泳法以及超高效合相色譜法檢測(cè)方法在化妝品中激素類成份的檢測(cè)上的應(yīng)用，對(duì)激素類成份富集方法優(yōu)化進(jìn)行概括，以期為監(jiān)管部門對(duì)化妝品中非法添加激素類成份的檢測(cè)提供技術(shù)支撐。
This paper reviews the detection methods of hormones in cosmetics and the pretreatment technology of cosmetics,including liquid chromatography,high performance liquid chromatography, ultra high performance liquid chromatography.liquid chromatography-mass spectrometry,liquid chromatography-high resolution mass spectrometry, capillary electrophoresis and ultra-performance convergence chromatography. The paper also summarizes optimization of hormone enrichment methods, providing technical support for the screening of added hormones in cosmetics by regulatory authorities.
關(guān)鍵詞 Key words
化妝品；糖皮質(zhì)激素；性激素；檢測(cè)方法
cosmetics; glucocorticoid; sex hormones; detection method
引言
國(guó)民經(jīng)濟(jì)的快速發(fā)展推動(dòng)了我國(guó)化妝品市場(chǎng)的繁榮，化妝品已經(jīng)從一種奢侈品逐漸變?yōu)樯畋匦杵?，其安全性越?lái)越受到消費(fèi)者的關(guān)注，其中非法添加違禁組分現(xiàn)象頻現(xiàn)，尤其是激素類成份的非法添加[1]。激素是由內(nèi)分泌細(xì)胞、內(nèi)分泌腺或內(nèi)分泌器官分泌，并可通過(guò)血液循環(huán)在細(xì)胞間傳遞化學(xué)信息的生物活性物質(zhì)。目前，對(duì)于化妝品中非法添加激素類成份的研究主要集中在糖皮質(zhì)激素和性激素檢驗(yàn)[2]。
激素是我國(guó)《化妝品安全技術(shù)規(guī)范（2015 版）》[3] 和歐盟化妝品法規(guī)（Direetive76/768/EEC）中明確規(guī)定禁止在化妝品中添加的組分。由于激素具有消炎、除皺、美白等作用，一些廠商仍在化妝品中非法添加激素以賺取不當(dāng)利潤(rùn)。長(zhǎng)期使用含有激素的化妝品易導(dǎo)致皮膚變薄、紅腫、發(fā)癢、代謝紊亂甚至致癌等[2]。對(duì)化妝品中激素類成份檢驗(yàn)的研究對(duì)保障消費(fèi)者健康具有重要意義。
1 化妝品樣品前處理技術(shù)
化妝品樣品前處理過(guò)程是成份檢測(cè)中的重要步驟，直接影響檢測(cè)結(jié)果的準(zhǔn)確性[4]。常用于化妝品樣品前處理的技術(shù)有溶劑萃取技術(shù)[5-6]、超聲提取法[7-9]、固相萃取技術(shù)[10-13]、QuEChERS法[14-16] 等。
1.1 溶劑萃取技術(shù)
溶劑萃取技術(shù)選用適宜的有機(jī)溶劑直接溶解樣品并提取出待測(cè)組分，是目前常用的一種前處理方法。溶劑萃取法要求所用溶劑對(duì)待測(cè)組分具有良好的溶解能力且不干擾后續(xù)分析測(cè)定。李靜等人[5] 選取乙腈為萃取溶劑，樣品經(jīng)飽和氯化鈉或正己烷分散后，采用乙腈作為提取溶劑對(duì)不同基質(zhì)的樣品進(jìn)行提取測(cè)定，發(fā)現(xiàn)乙腈可有效避免基質(zhì)的干擾。
Mingqin Kang 等人[6] 使用[C6MIM][BF4] 離子液體均相萃取技術(shù)，提取并測(cè)定了化妝品中的17α- 雌二醇、17α- 乙炔雌二醇、雌酮、17α- 羥孕酮、甲羥孕酮、醋酸甲地孕酮、醋酸炔諾酮和黃體酮。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，離子液體均相萃取適用于化妝品中激素的提取，可用于化妝品的有效分析。
溶劑萃取技術(shù)在有機(jī)溶劑消耗、操作流程和分析時(shí)間等方面具有一定的優(yōu)勢(shì)，且萃取法操作簡(jiǎn)單，但對(duì)于基質(zhì)復(fù)雜的樣品凈化效果較差。
1.2 超聲提取法
超聲提取法是目前化妝品中使用較多的前處理方法之一，其具有簡(jiǎn)便、快速的優(yōu)點(diǎn)。超聲提取法是利用超聲波的空化作用，加速樣品中的目標(biāo)成份進(jìn)入提取溶劑，能夠顯著提高提取效率，廣泛應(yīng)用于化妝品中激素類成份的提取。
董亞蕾等人[7] 以乙腈為提取溶劑，對(duì)樣品進(jìn)行超聲提取，采用UHPLC-MS/MS 在多重反應(yīng)監(jiān)測(cè)（MRM）模式下對(duì)嬰幼兒濕疹類產(chǎn)品中的43 種糖皮質(zhì)激素類藥物進(jìn)行定性篩查。施炎炎等人[8]采用乙腈超聲提取，離心經(jīng)氮吹后對(duì)41 種糖皮質(zhì)激素的進(jìn)行了篩查。胡貝等人[9] 采用50% 乙腈對(duì)樣品進(jìn)行超聲提取，后采用UPLC-MS/MS 檢測(cè)了化妝品中35 種性激素。
對(duì)樣品采用超聲提取可得到良好的實(shí)驗(yàn)結(jié)果，且超聲提取操作簡(jiǎn)便，能夠廣泛用于化妝品樣品中目標(biāo)物質(zhì)的提取。
1.3 固相萃取技術(shù)
固相萃取(SPE) 技術(shù)是20世紀(jì)80 年代中期發(fā)展起來(lái)的一項(xiàng)樣品前處理技術(shù)，是液固萃取技術(shù)和液相色譜技術(shù)的結(jié)合[17]。該技術(shù)采用選擇性吸附、洗脫的方式對(duì)樣品進(jìn)行富集、分離和純化，一定程度上能夠降低化妝品中基質(zhì)對(duì)分析檢測(cè)的干擾。本文對(duì)采用固相萃取技術(shù)的文獻(xiàn)進(jìn)行了匯總詳見(jiàn)表1。
采用固相萃取技術(shù)對(duì)化妝品樣品進(jìn)行凈化處理，可得到良好的實(shí)驗(yàn)結(jié)果，且固相萃取技術(shù)具有操作簡(jiǎn)單，能夠提高回收率的優(yōu)勢(shì)，廣泛用于化妝品樣品的前處理。
1.4 QuEChERS 法
QuEChERS 法由美國(guó)農(nóng)業(yè)部開(kāi)發(fā)，是近年來(lái)發(fā)展起來(lái)的一種用于農(nóng)產(chǎn)品檢測(cè)的快速樣品前處理技術(shù)。QuEChERS 法是利用吸附劑填料與基質(zhì)中的雜質(zhì)相互作用，吸附雜質(zhì)從而達(dá)到除雜凈化的目的。
范小龍等人[14] 將樣品經(jīng) 1%(V/V) 甲酸- 乙腈提取， 加入氯化鈉進(jìn)行鹽析，提取液經(jīng) C1850 mg、N- 丙基乙二胺（PSA）100 mg、MgSO4 150 mg 凈化，提取測(cè)定了化妝品中16 種糖皮質(zhì)激素。張亞鋒等人[15] 以乙腈提取樣品，加入 0.2 ml 乙酸鋅溶液和0.2 ml 亞鐵氰化鉀溶液，渦旋離心后，提取液經(jīng)QuEchERS 凈化管（50 mg MgSO4、 100 mgPSA、100 mg C18） 凈化， 提取測(cè)定了化妝品中非法添加的氯倍他索丙酸酯。趙洋等人[16] 將樣品經(jīng)飽和氯化鈉分散、乙腈提取,亞鐵氰化鉀- 醋酸鋅沉淀大分子基質(zhì)后，通過(guò)QuEChERS 凈化測(cè)定了化妝品中同分異構(gòu)體構(gòu)型糖皮質(zhì)激素。
由于該法具有簡(jiǎn)便、快速等優(yōu)點(diǎn)， 如今，QuEChERS 法在分析化妝品禁用組分方面也得到了良好應(yīng)用。
2 化妝品中激素類成份標(biāo)準(zhǔn)檢測(cè)方法
近年來(lái)，我國(guó)先后發(fā)布了多個(gè)激素檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)，包括《化妝品中四十一種糖皮質(zhì)激素的測(cè)定 液相色譜/ 串聯(lián)質(zhì)譜法和薄層層析法》（GB/T 24800.2—2009）；《化妝品中七種性激素的測(cè)定 超高效液相色譜- 串聯(lián)質(zhì)譜法》（GB/T 34918—2017）；《進(jìn)出口化妝品中糖皮質(zhì)激素類與孕激素類檢測(cè)方法》（SN/T 2533—2010）；《化妝品安全技術(shù)規(guī)范（2015 年版）》中第四章2.4 項(xiàng)“雌三醇等7 種組分”，2.5 項(xiàng)“米諾地爾等7 種組分”，2.25 項(xiàng)“米諾地爾”的理化檢驗(yàn)方法；國(guó)家藥監(jiān)局2019 年第66 號(hào)通告中將《化妝品中激素類成份的檢測(cè)方法》納入《化妝品安全技術(shù)規(guī)范（2015 年版）》第四章2.34 項(xiàng)。
3 化妝品中激素類成份其他檢測(cè)方法
3.1 糖皮質(zhì)激素類成份檢測(cè)方法
糖皮質(zhì)激素具有調(diào)節(jié)糖、脂肪和蛋白質(zhì)生物合成和代謝作用。由于其能夠抑制纖維細(xì)胞的增生，對(duì)皮膚具有一定的美白作用，短期使用可以達(dá)到美容效果。但長(zhǎng)期使用含有糖皮質(zhì)激素的化妝品會(huì)導(dǎo)致內(nèi)分泌紊亂、皮膚變薄等傷害[2]。常用于檢測(cè)化妝品中糖皮質(zhì)激素類成份的檢測(cè)方法有高效液相色譜法[18-19]、超高效液相色譜法[20]、液相色譜- 串聯(lián)質(zhì)譜法[12、17、21-23]、液相色譜-高分辨質(zhì)譜法[24-26]、毛細(xì)管電泳法[27-29]。
3.1.1 高效液相色譜法
趙曉亞等人[18] 建立了反相高效液相(RP-HPLC) 法測(cè)定化妝品中9 種糖皮質(zhì)激素。樣品采用酸化甲醇提取，經(jīng)Oasis HLB 固相萃取小柱凈化，高效液相色譜法分離，DAD 檢測(cè)器檢測(cè)。該方法回收率為85.0%~99.5%，RSD 小于5.8%，可用于化妝品中潑尼松龍等9 種糖皮質(zhì)激素的測(cè)定。
劉洪亮等人[19] 建立了高效液相色譜法，樣品經(jīng)甲醇超聲提取，結(jié)合固相萃取柱富集凈化，采用EcosilC18 色譜柱（250mm ×1.6mm）分離，以乙腈和水作為流動(dòng)相，DAD 紫外全波長(zhǎng)掃描，分離檢測(cè)曲安西龍等8 種激素。該操作方法比較簡(jiǎn)單，且分析時(shí)間較短，6min 之內(nèi)便可完成分離檢測(cè)，適用于美白祛斑類化妝品中8 類激素的測(cè)定。
3.1.2 超高效液相色譜法
周江等人[20] 建立了使用超高效液相色譜法，同時(shí)測(cè)定美白、祛痘化妝品中氫化可的松、曲安奈德醋酸酯、氯倍他索丙酸酯以及倍他米松雙丙酸酯4 種糖皮質(zhì)激素的方法。樣品經(jīng)甲醇提取，采用 Waters ACQUITY UPLCBEH C18 色譜柱（100mm×2.1 mm，1.7 μm），以乙腈– 水溶液為流動(dòng)相，PDA 檢測(cè)器檢測(cè)。該方法樣品前處理過(guò)程簡(jiǎn)便，分離效果好，靈敏度高，所測(cè)結(jié)果的RSD為2.1%~5.0%（n=6）， 可以滿足美白、祛痘類化妝品中4 種糖皮質(zhì)激素檢測(cè)需求。
3.1.3 液相色譜- 串聯(lián)質(zhì)譜法
潘小紅等人[21] 建立了全自動(dòng)固相萃取- 超高效液相色譜- 串聯(lián)質(zhì)譜檢測(cè)嬰幼兒濕疹類產(chǎn)品中種42 糖皮質(zhì)激素的方法。樣品經(jīng)飽和氯化鈉溶液分散，乙腈提取，采用HLB 固相萃取柱凈化，經(jīng)Dikma EndeavorsilTMC18 色譜柱（100 mm × 2.1 mm，1.7μm）分離， 在ESI+ 模式下以MRM方式檢測(cè)，外標(biāo)法定量。該方法簡(jiǎn)便、靈敏度高，適用于嬰幼兒濕疹類產(chǎn)品中糖皮質(zhì)激素的檢測(cè)。
蔣德莉[22] 建立了高效液相色譜- 串聯(lián)質(zhì)譜法測(cè)定了化妝品中10 種糖皮質(zhì)激素的方法。樣品用飽和氯化鈉溶液分散，乙腈提取， 經(jīng)Creole HLB SPE 固相萃取柱凈化， 采用Thermo Accucore RP-MSC18 柱（2.1mm×100mm） 分離， 以0.1% 甲酸- 乙腈為流動(dòng)相梯度洗脫，在電噴霧正離子模式下以多反應(yīng)監(jiān)測(cè)方式測(cè)定。10 種糖皮質(zhì)激素的檢出限和定量限分別為0.03μg/g 和0.1 μg/g，該方法靈敏度高、干擾少、檢測(cè)結(jié)果準(zhǔn)確。
劉紅等人[11] 建立了通過(guò)式高效凈化/ 超高效液相色譜- 串聯(lián)質(zhì)譜法測(cè)定化妝品中73 種糖皮質(zhì)激素。樣品經(jīng)飽和氯化鈉溶液分散，乙腈提取，用PRiME HLB固相萃取柱（60 mg/3 ml）凈化，采用Waters Cortecs C18 色譜柱（150 mm×2.1 mm，2.7μm）進(jìn)行分離。在ESI+ 模式下，采用MRM 掃描方式測(cè)定，外標(biāo)法定量。結(jié)果表明，該方法中73 種糖皮質(zhì)激素線性關(guān)系良好，相關(guān)系數(shù)均大于0.99，測(cè)定結(jié)果準(zhǔn)確、快速、高效。
趙洋等人[17] 建立超高效液相色譜- 串聯(lián)質(zhì)譜法測(cè)定化妝品中同分異構(gòu)體構(gòu)型糖皮質(zhì)激素的分析方法。樣品采用飽和氯化鈉溶液分散，乙腈提取，亞鐵氰化鉀- 醋酸鋅沉淀大分子基質(zhì)后，經(jīng)分散固相萃取技術(shù)凈化，采用安捷倫Poroshell 120 PFP 色譜柱（100mm× 2.1mm，2.7μm）分離，電噴霧正離子模式下采用多反應(yīng)監(jiān)測(cè)模式對(duì)美白祛斑類化妝品中同分異構(gòu)體構(gòu)型糖皮質(zhì)激素進(jìn)行定量和定性測(cè)定。該方法具有較好的準(zhǔn)確度和精密度，方法簡(jiǎn)單高效，適用于膏霜、乳液、粉劑等常見(jiàn)化妝品中糖皮質(zhì)激素類化合物的檢驗(yàn)。
Vita Giaccone 等人[23] 建立了一種快速的高效液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法，用于測(cè)定化妝品中的10 種糖皮質(zhì)激素。樣品經(jīng)乙腈提取，采用反相液相色譜法分離，電噴霧正負(fù)離子模式進(jìn)行檢測(cè)。所有分析物的平均回收率在91.9%~99.2％的范圍內(nèi)，該方法靈敏度高，可用于化妝品中糖皮質(zhì)激素類成份的檢測(cè)。
3.1.4 液相色譜- 高分辨質(zhì)譜法
李強(qiáng)等人[24] 建立了超高效液相色譜- 四極桿- 靜電場(chǎng)軌道阱質(zhì)譜篩查化妝品中可能存在的12 種糖皮質(zhì)激素的分析方法。樣品用乙腈提取， 采用Acquity UPLC BEH C18 色譜柱（100mm×2.1mm，1.7μm） 進(jìn)行分離。以正離子全掃描模式得到潑尼松龍等12 種糖皮質(zhì)激素的精確質(zhì)量數(shù)，建立了篩查表，實(shí)現(xiàn)了12 種糖皮質(zhì)激素類成份的篩查。該方法前處理簡(jiǎn)單、抗干擾性強(qiáng)、靈敏度高，可作為化妝品中非法添加糖皮質(zhì)激素類組分的篩查確認(rèn)方法。
羅輝泰等人[25] 建立了QuEChERS- 同位素稀釋- 液相色譜- 四極桿串聯(lián)飛行時(shí)間質(zhì)譜同時(shí)快速篩查化妝品中86 種糖皮質(zhì)激素類成份的高通量方法。樣品用乙腈提取，采用改進(jìn)的QuEChERS 法凈化。在電噴霧正離子模式下建立了一級(jí)精確質(zhì)量數(shù)及二級(jí)碎片離子質(zhì)譜圖數(shù)據(jù)庫(kù)。該方法無(wú)需標(biāo)準(zhǔn)品即可完成化妝品中86 種糖皮質(zhì)激素類成份的篩查確證。平均回收率為66.2%~112.8%，RSD 為4.6%~13.9%，LOD 為0.006~0.015mg/kg，LOQ 為0.02~0.05mg/kg。該方法高效、簡(jiǎn)便，適用于化妝品中糖皮質(zhì)激素類成份的高通量篩查。
徐振東等人[26] 基于在線凈化液相色譜- 四極桿/ 靜電場(chǎng)軌道阱高分辨質(zhì)譜技術(shù)建立了化妝品中41 種糖皮質(zhì)激素的分析方法。樣品用乙腈提取， 色譜分離后，采用四極桿/ 靜電場(chǎng)軌道阱高分辨質(zhì)譜以Full Scan/ddMS2 模式進(jìn)行檢測(cè)。該方法定量下線為10μg/kg， 加標(biāo)回收率為71.3%~108.5%，RSD 為2.7%~7.9%。該方法操作簡(jiǎn)單、快速、高效，適用于化妝品中糖皮質(zhì)激素的快速篩查和測(cè)定。
針對(duì)化妝品中多類禁用組分的高通量識(shí)別和非目標(biāo)成份鑒定，王海燕等人[30] 建立了化妝品中高風(fēng)險(xiǎn)化合物篩查鑒定技術(shù)平臺(tái)。目前已有的研究成果已經(jīng)涵蓋了近百種激素的篩查方法和200 余種抗生素等的篩查方法?；瘖y品中高風(fēng)險(xiǎn)物質(zhì)篩查平臺(tái)的建立，能夠有效保障市場(chǎng)監(jiān)管高效有序，滿足化妝品安全監(jiān)管的預(yù)警需求。
3.1.5 毛細(xì)管電泳法
郭成方等人[27] 立了一個(gè)簡(jiǎn)單有效的微乳毛細(xì)管電動(dòng)色譜在線富集- 大體積進(jìn)樣與非勻強(qiáng)電場(chǎng)掃集聯(lián)用測(cè)定化妝品中潑尼松、氫化可的松、潑尼松龍和倍他米松的方法。樣品用甲醇提取，在最優(yōu)實(shí)驗(yàn)條件下，4 種糖皮質(zhì)激素富集倍數(shù)為853~933 倍， 在0.015~14mg/L 范圍內(nèi)呈線性關(guān)系，檢出限為4~8μg/L。該方法前處理簡(jiǎn)單，重現(xiàn)性好，為化妝品中痕量糖皮質(zhì)激素的分離測(cè)定提供了一種新方法。
李萌等人[28] 建立了以離子液體和β- 環(huán)糊精為添加劑的反向微乳毛細(xì)管電泳法分離測(cè)定化妝品中丙酸氟替卡松、曲安奈德、醋酸可的松、地塞米松、氫化可的松以及潑尼松6 種糖皮質(zhì)激素的方法。在優(yōu)化的實(shí)驗(yàn)條件下，該方法用于化妝品樣品測(cè)定，加標(biāo)回收率在93.5％ ~105％之間，RSD 均小于4.3％。該方法樣品處理簡(jiǎn)單、方法經(jīng)濟(jì)快速、靈敏度高，適用于化妝品中糖皮質(zhì)激素類成份的檢測(cè)。
李萌等人[29] 建立了場(chǎng)放大進(jìn)樣- 膠束毛細(xì)管電泳法測(cè)定化妝品中氫化可的松、潑尼松和乙酸氫化可的松3種糖皮質(zhì)激素的方法。電泳介質(zhì)為0.20mmol/L 硼砂緩沖溶液（pH 9.0），在優(yōu)化試驗(yàn)條件下，氫化可的松、潑尼松和乙酸氫化可的松的LOD 分別0.015, 0.017, 0.017 mg/L， 回收率在93.8%~107%，RSD 均小于5.1%，該法可快速靈敏地測(cè)定化妝品中糖皮質(zhì)激素類成份的含量。
3.2 性激素類成份檢測(cè)方法
性激素具有控制附性器官和第二性征的生理作用，將其添加到化妝品中，具有促進(jìn)毛發(fā)生長(zhǎng)、豐乳、美白、除皺和增加皮膚彈性等作用。長(zhǎng)期使用含有性激素的化妝品會(huì)產(chǎn)生一系列的皮膚問(wèn)題，甚至具有致癌風(fēng)險(xiǎn)[2]。常用于檢測(cè)化妝品中性激素類成份的方法有液相色譜法[31]、高效液相色譜法[32-33]、超高效合相色譜法[34]、液相色譜- 串聯(lián)質(zhì)譜法[9，35-37]、液相色譜- 高分辨質(zhì)譜法[38-39]。
3.2.1 液相色譜法
Pengqi Guo 等人[31] 建立了一種分子印跡整體柱二維液相色譜方法（MIMC-2D-LC），用于快速、選擇性地測(cè)定各種化妝品樣品中的雌二醇。雌二醇的MIMC-2D-LC 線性范圍為0.5~50μg/g，檢出限為0.08μg/g。經(jīng)過(guò)驗(yàn)證，該方法已成功用于檢測(cè)化妝品樣品中的雌二醇。
3.2.2 高效液相色譜法
楊德輝等人[32] 建立了利用雙頻超聲波萃取前處理及高效液相色譜法同時(shí)測(cè)定化妝品中7 種甾體激素的方法。采用五氟苯基鍵合硅膠柱（100mm× 2.1mm×2.6μm）分離。經(jīng)測(cè)定，7 種甾體激素的標(biāo)準(zhǔn)曲線在0.08~52.0μg/ml 范圍內(nèi)線性關(guān)系良好，相關(guān)系數(shù)大于0.999，回收率86.0%~113.2%，RSD 為2.4%~7.6%，LOD 為20~50ng/ml。該方法前處理簡(jiǎn)便，7 種甾體激素10min 內(nèi)出峰且分離良好。
程俊等人[33] 建立了高效液相色譜- 二極管陣列/ 熒光檢測(cè)器串聯(lián)測(cè)定化妝品中雌三醇、雌二醇、睪酮、炔雌醇、己烯雌酚、乙酸甲地孕酮、孕酮和丙酸睪酮8 種性激素的分析方法。采用ZORBAX Eclipse XDB-C18 柱（5μm, 4.6 mm×150 mm） 分離，DAD-FLD 串聯(lián)法檢測(cè)。該方法LOD 為0.1~0.5μg/g，回收率為90.3%~102.9%，RSD 為0.4%~4.8%。該法操作簡(jiǎn)便、快速、靈敏。
3.2.3 超高效合相色譜法
龐道標(biāo)等人[34] 建立了超高效合相色譜法分離和測(cè)定化妝品中6種性激素的方法。該方法采用乙腈提取，Waters Hss C18 SB色譜柱分離，二氧化碳和甲醇為流動(dòng)相進(jìn)行梯度洗脫，經(jīng)超高效合相色譜分離，PDA 檢測(cè)器進(jìn)行檢測(cè)。該方法快速、前處理簡(jiǎn)便、對(duì)環(huán)境污染少、運(yùn)行成本低，有較高的實(shí)用價(jià)值，可用于對(duì)化妝品中性激素添加的監(jiān)管和產(chǎn)品質(zhì)量控制。
3.2.4 液相色譜- 串聯(lián)質(zhì)譜法
岳磊等人[35] 建立了同時(shí)測(cè)定化妝品中5種禁用性激素的超高效液相色譜- 串聯(lián)質(zhì)譜的方法。樣品經(jīng)甲醇處理， 采用ACQUITY UPLC. BEN C18 柱（2.1mm×50mm, 1.7 μm） 分離， 電噴霧正離子模式， 多反應(yīng)監(jiān)測(cè)聯(lián)合相關(guān)信息掃描與增強(qiáng)離子掃描。結(jié)果表明， 線性范圍為1~100mg/L， 相關(guān)系數(shù)r 大于0.999，平均回收率為79.8%~115.3%，相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差為1.43%~11.36%。該方法操作簡(jiǎn)單、靈敏度高，可有效測(cè)定化妝品中性激素。
茹歌等人[36] 建立了超高效液相色譜- 串聯(lián)質(zhì)譜同時(shí)測(cè)定化妝品中13 種性激素含量的分析方法。樣品用乙腈超聲提取，采用Poroshell120 EC-C18 柱（4.6mm×100mm, 2.7 μm） 分離，電噴霧正負(fù)離子模式，經(jīng)動(dòng)態(tài)多反應(yīng)監(jiān)測(cè)掃描方式測(cè)定。該方法回收率為80.8%~116.8%，RSD 為0.7%~14.4%。該方法靈敏度高、準(zhǔn)確度高，適用于多種基質(zhì)類型化妝品中性激素類成份的快速篩查。
李卓等人[37] 建立了化妝品中14 種性激素?zé)o基質(zhì)效應(yīng)影響的超高效液相- 串聯(lián)質(zhì)譜分析方法。樣品經(jīng)飽和氯化鈉分散，乙腈提取，冷凍離心，用乙腈10 倍稀釋以消除基質(zhì)效應(yīng)影響， 采用Thermo C18 色譜柱（100mm×2.1mm, 1.9μm） 分離，采用MRM 進(jìn)行分析，平均回收率為90.8%~115.2%。該方法準(zhǔn)確、靈敏度高，可用于化妝品中14 種性激素的測(cè)定。
胡貝等人[9] 建立了超高效液相色譜- 串聯(lián)質(zhì)譜同時(shí)測(cè)定化妝品中35 種性激素的方法。樣品用50% 乙腈水溶液超聲提取， 采用CORTECS C18色譜柱（2.1mm×150mm，2.7μm） 分離， 電噴霧正負(fù)離子模式，采用多反應(yīng)監(jiān)測(cè)模式測(cè)定。結(jié)果表明，該方法有良好的線性關(guān)系(r ＞ 0.99)，檢出限為0.028~0.117μg/g，定量下限為0.093~0.352μg/g，前處理簡(jiǎn)便、靈敏度高。
3.2.5 液相色譜- 高分辨質(zhì)譜法
許波等人[38] 建立了液相色譜- 四極桿- 線性離子阱質(zhì)譜法測(cè)定護(hù)膚類化妝品中7 種性激素含量的方法。樣品用1.0% 乙酸的乙腈溶液提取，WatersC18色譜柱（2.1 mm×100 mm,1.7μm）分離，電噴霧正負(fù)離子模式同時(shí)掃描。結(jié)果表明，7 種性激素線性關(guān)系良好（r ＞ 0.9991），LOQ 為2.0~5.0μg/L， 回收率為88.7%~110.7%，RSD 為2.7%~6.2%，該方法適用于化妝品中性激素類成份的篩查和測(cè)定。
張曉璐等人[39] 建立了UPLCQTOF-MS 法快速測(cè)定化妝品中添加的７種性激素。該方法使用Agilent ZORBAX Extend-C18（2.1×50mm， 1.8μm）柱，以乙腈- 水為流動(dòng)相，電噴霧正負(fù)離子模式同時(shí)掃描檢測(cè)。該方法檢出限在3~80ng/mg 之間，回收率在80.3%~103.5% 之間。該方法靈敏度較高，可作為化妝品中非法添加性激素的測(cè)定方法。
3.3 化妝品中激素類成份的檢驗(yàn)
目前，部分研究人員所建立的檢測(cè)方法同時(shí)包含了檢測(cè)糖皮質(zhì)激素、性激素以及其他禁限用組分，大部分都采用液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法[40-44]。本文對(duì)化妝品中含激素類違禁組分的檢驗(yàn)文獻(xiàn)進(jìn)行了匯總，詳見(jiàn)表2。
3.4 化妝品激素類成份富集方法的優(yōu)化
Aixia Wei 等人[45] 成功地建立了一種新的基于多孔整體聚合物的液相固相萃取法測(cè)定化妝品中糖皮質(zhì)激素的方法。采用一鍋法制備中空纖維的纖溶- 固相萃取裝置。在最佳條件下優(yōu)化了制備工藝參數(shù)和性能，利用整體式微萃取棒富集化妝品樣品中的糖皮質(zhì)激素進(jìn)而進(jìn)行高效液相色譜法測(cè)定。結(jié)果表明，該方法簡(jiǎn)便、準(zhǔn)確，可用于復(fù)雜化妝品樣品中糖皮質(zhì)激素的預(yù)處理和測(cè)定。
Min Liu 等人[46] 提出了一種新穎的方法，以氫化可的松和地塞米松為模板分子，設(shè)計(jì)合成磁分子印跡聚合物，該聚合物可用于化妝品樣品的分析。結(jié)果表明，雙模板磁分子印跡聚合物的表面聚合制備具有較大的比表面積，較高的磁強(qiáng)度和較快的吸收速率。從化妝品樣品中選擇性分離和富集氫化可的松和地塞米松，經(jīng)過(guò)適度溫和的洗脫后具有良好的回收率。該方法在用于選擇性分離和測(cè)定痕量氫化可的松和地塞米松中十分具有發(fā)展前景。
Pengqi Guo 等人[47] 建立了選擇性單分散分子印跡微球基質(zhì)固相分散與高效液相色譜（MMIM-MSPD-HPLC） 相結(jié)合測(cè)定化妝品中地塞米松和氫化可的松的方法。結(jié)果表明，制備的分子印跡單分散微球?qū)Φ厝姿珊蜌浠傻乃删哂辛己玫奶禺愋杂H和力，所得提取物清洗徹底，可直接進(jìn)行高效液相色譜分析，不受基質(zhì)干擾。該方法具有良好的特異性， 為有效監(jiān)測(cè)化妝品和其他復(fù)雜樣品中的地塞米松及其他糖皮質(zhì)激素殘留提供的新的前景。
Zexin Zhao 等人[48] 建立了一種快速高效的基于低共熔溶劑的磁性膠體（DES-MCG）輔助磁性固相萃取（MSPE）法，然后采用二極管陣列檢測(cè)器進(jìn)行高效液相色譜法測(cè)定四種化妝品中的性激素。在優(yōu)化條件下，四種性激素在不同護(hù)膚品中的回收率為80.1%~118.8%，RSD 不超過(guò)0.35%。該方法簡(jiǎn)便、高效、環(huán)保，適用于爽膚水性激素的檢測(cè)，滿足了化妝品中激素類綠色分析化學(xué)研究的需要。
4 總結(jié)、展望
本文對(duì)化妝品中非法添加激素相關(guān)檢測(cè)方法進(jìn)行了綜述，發(fā)現(xiàn)激素類成份的檢測(cè)方法大多適用于水劑、乳液、膏霜類以及粉類化妝品，關(guān)于兒童用化妝品以及塊狀化妝品，如口紅等產(chǎn)品以及油狀類化妝品中激素類成份的檢測(cè)報(bào)道較少。本文旨在為化妝品監(jiān)管部門提供參考和技術(shù)支持，為化妝品中非法添加物質(zhì)的檢測(cè)提供參考依據(jù)。
第一作者簡(jiǎn)介
王欣然，碩士研究生，中國(guó)食品藥品檢定研究院。專業(yè)方向：食品化妝品安全技術(shù)研究
通訊作者簡(jiǎn)介
路勇，博士，教授，中國(guó)食品藥品檢定研究院副院長(zhǎng)。專業(yè)方向：食品化妝品監(jiān)管
本文來(lái)源：《中國(guó)食品藥品監(jiān)管》雜志
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